fysiologie

ORAC: meting van antioxidantvermogen

Test Orac (Oxygen Radical Absorbance Capacity)

De ORAC-test is de methode die recent de referentietechniek is geworden voor het meten van de antioxiderende werking van voedingsmiddelen en supplementen.

De test is gebaseerd op het vermogen van een antioxidant om de oxidatieve afbraak van een fluorescerend molecuul veroorzaakt door peroxylradicalen (ROO •) te remmen. De meest gebruikte fluorescerende stoffen zijn beta-fycoerythrine, fluoresceïne en pyrogallol, die verschillen in stabiliteit en reactiviteit. De peroxyradicalen, gegenereerd door thermische ontleding van een azocompositie-initiator (AAPH), vallen het fluorescente molecuul aan, breken het af, met als gevolg verlies van fluorescentie die wordt gemeten door een fluorometer.

Anti-oxidant supplement Antiage X115 + Plus

Nieuw generatie antiverouderingssupplement. Double Day & Night-formulering met hoge concentratie van activa; ondersteunt en optimaliseert antioxidantafweer en stimuleert de synthese van collageen, hyaluronzuur en elastine . «Meer informatie»

Een antioxidant concurreert met het substraat gevormd door het fluorescente molecuul dat reageert met de radicalen voordat ze het molecuul zelf kunnen beschadigen, waardoor het fluorescentie-vervalproces wordt geremd. Het verschil tussen het verval van de fluorescentie in de afwezigheid en in de aanwezigheid van het antioxidantmolecuul vertegenwoordigt een maat voor het vermogen van een stof om de reactiviteit van vrije radicalen te dempen. De antioxidatieve capaciteit ORAC wordt uitgedrukt als ORAC-eenheden, overeenkomend met Trolox® micromol-equivalent per gram monster, waarbij Trolox® een verbinding is met antioxidantactiviteit gekozen als referentiestandaard.

De ORAC-methode is wijdverspreid als een test voor het meten van antioxidantvermogen, omdat het nauwkeurige en reproduceerbare metingen biedt, met aanvaardbare kosten. Verder is het automatiseerbaar en toepasbaar, met modificatie van het protocol, zowel voor hydrofiele als voor lipofiele stoffen. De methode heeft echter ook zijn limieten. Ten eerste maakt het meetmechanisme van de ORAC-test alleen een kwantitatieve beoordeling van de antioxidantwerking van het molecuul mogelijk, dwz het geeft precies aan hoeveel vrije radicalen een antioxidant substantie kan deactiveren, maar geeft geen enkele indicatie van de snelheid waarmee dit gebeurt. De snelheid van inactivering van vrije radicalen is een belangrijke parameter om de effectiviteit van een antioxidant te bepalen, want hoe sneller de radicalen reageren, hoe kleiner de kans is dat ze biologische structuren kunnen aanvallen die schade veroorzaken.

Bovendien kan de ORAC-waarde van een antioxidant sterk variëren, afhankelijk van het gebruikte analyseprotocol. Naast de extractiemethode en de temperatuur waarbij de analyse wordt uitgevoerd, is de keuze van de fluorescerende probe van groot belang bij het bepalen van het uiteindelijke resultaat, zodat metingen verkregen met verschillende fluorescerende moleculen meestal niet vergelijkbaar zijn. Daarom is het voor het vergelijken van de ORAC-resultaten met antioxidantcapaciteit van verschillende stoffen belangrijk om het protocol te kennen, omdat de waarden alleen vergelijkbaar zijn met hetzelfde analytische protocol.

Niettemin heeft de verspreiding van deze methode ons in staat gesteld om de ORAC-capaciteit van veel voedingsmiddelen, met name groenten en fruit, te bepalen door referentietabellen te maken die wijd verspreid zijn en op het gebied van voeding worden gebruikt. In dit verband stelt het Amerikaanse ministerie van Landbouw voor ongeveer 5000 ORAC-eenheden per dag te nemen, te verkrijgen door ongeveer vijf porties fruit en groenten te consumeren, om de activiteit van vrije radicalen effectief tegen te gaan.

Het is interessant om op te merken dat de lijst met antioxiderende kracht van verschillende voedingsmiddelen volgens de schaal van ORAC, bijgewerkt tot 2010, is verwijderd van de USDA-website; in een notitie motiveert de afdeling deze keuze met 1) de schaarste aan klinische gegevens ter ondersteuning van de feitelijke in vivo overdraagbaarheid van de in vitro uitgevoerde antioxidanttests; 2) de afwezigheid van voldoende bewijs om aan te nemen dat de gunstige effecten van voedingsmiddelen die rijk zijn aan polyfenolen kunnen worden toegeschreven aan hun antioxiderende eigenschappen. Tegenwoordig weten we dat door voedsel overgedragen anti-oxidantmoleculen een breed scala aan functies hebben, waarvan vele het vermogen om vrije radicalen te absorberen, vreemd zijn. Hun gunstige effect op de gezondheid lijkt daarom voort te komen uit werkingsmechanismen die onafhankelijk zijn van de antioxidantkracht.