Wat is het antibiogram?
Het antibiogram is een microbiologische test die wordt gebruikt om de gevoeligheid van een micro-organisme voor een of meer antimicrobiële geneesmiddelen te testen.
Uitgezonderd voornamelijk op sanitair niveau, wordt het antibiogram traditioneel uitgevoerd op monsters van bacteriekolonies afgeleid van eenheden genomen door keelholte, urethrale, rectale of vaginale uitstrijkjes of geïsoleerd uit feces, urine of sputummonsters.
Uitvoerende technieken en antibioticaresistentie
Het antibiogram wordt vaak uitgevoerd met de agar-diffusiemethode, ook wel de Kirby-Bauer-techniek genoemd.
Tijdens de procedure wordt een bacteriemonster uit de kolonies genomen en gezaaid (geschikt verwijderd) op de juiste grond, waarin in antibiotica gedrenkte schijven worden gedrenkt in bekende concentraties (gedicteerd door therapeutische behoeften). De plaat wordt vervolgens in een incubator geplaatst en na een vooraf bepaalde tijdsperiode (bijvoorbeeld 18 uur bij 35 ° C) is het mogelijk een relatief uniforme microbiële groei te waarderen, met min of meer brede halo's rond de papieren slabbetjes. Op basis van de omvang van deze remmende gebieden, wordt de vatbaarheid van de bacterie voor elk getest individueel antibioticum beoordeeld: als de diameter groot is, is het micro-organisme gevoelig voor het medicijn (S), terwijl het, als het klein is, een intermediaire gevoeligheid heeft (I of MS), terwijl, indien de onderzochte bacteriesoorten verwaarloosbaar of zelfs afwezig zijn, het resistent (R) is voor het geneesmiddel. Om de bacteriegevoeligheid nauwkeurig te bepalen, wordt de diameter van de remminghalo's gemeten in mm, waarbij de verkregen waarden worden vergeleken met de standaardwaarden voor de bacteriestam.
Hoe antibioticaresistentie te voorkomen
Antibiotica werken NIET tegen virussen; Typische virale infecties zijn verkoudheid, griep, laryngitis, bronchitis, kroep en de meeste keelpijn (faryngitis).
Het gebruik van antibiotica wanneer ze niet nodig zijn (bijvoorbeeld bij verkoudheid of griep) kan leiden tot de ontwikkeling van antibioticaresistentie (bacteriën zijn "antibioticaresistent" wanneer ze niet door het antibioticum kunnen worden gedood).
LET OP: het is de bacterie die resistent is tegen het antibioticum, NIET tegen het individu. Daarom, zelfs als u nog nooit antibiotica hebt gebruikt, kunt u infecties ontwikkelen die worden veroorzaakt door antibioticaresistente bacteriën.
Om het ontstaan van antibiotica-resistentie te voorkomen, is het FUNDAMENTEEL om de door de arts voorgeschreven therapie te voltooien; zelfs als het goed voelt om antibiotica voortijdig te stoppen.
Wanneer tijdens het antibiogram de halo's van de naburige schijven samenvloeien, worden de betreffende antibiotica als synergistisch beschouwd.
Als een alternatief voor de zojuist beschreven methode, kan het antibiogram ook op een vloeibaar medium worden uitgevoerd, waarbij - na incubatie - de troebelheid wordt geëvalueerd die overeenkomt met verschillende graden van geneesmiddelverdunning (zie hieronder).
Het antibiogram is nu een essentiële test geworden, gezien de nu wijdverspreide diffusie van het fenomeen van resistentie tegen geneesmiddelen. Het kiezen van het verkeerde antibioticum of het gebruik van een breed-spectrummedicijn om deze procedure te vermijden kan in feite de bacteriestammen selecteren die resistent zijn tegen de werking van hetzelfde. In het artikel dat aan dit onderwerp is gewijd, hebben we gezien hoe deze capaciteit oorspronkelijk werd verkregen voor spontane mutaties en vervolgens werd overgedragen op andere bacteriën. Het is daarom geen toeval dat de ontdekking en het klinisch gebruik van veel antibiotica hand in hand gaan met het voorkomen van bacteriën die resistent zijn tegen hun werking. Fouten, heel vaak, van een ongepast en overdreven gebruik van deze medicijnen, bijvoorbeeld om virale infecties te genezen waartegen ze volledig nutteloos blijken te zijn (de enige mogelijke rechtvaardiging is om bacteriële superinfecties bij mensen met een verhoogd risico te voorkomen).
Twee zeer belangrijke parameters afgeleid van het antibiogram zijn de MIC en de MBC:
- MIC (minimale remmende concentratie, minimale remmende concentratie): het is de laagste concentratie van de te onderzoeken verbinding die nodig is om de groei van een bepaald micro-organisme te remmen.
- MBC (minimale bacteriële concentratie): is de laagste concentratie van de onderzochte verbinding die nodig is om de dood van meer dan 99, 9% van een gegeven microbiële populatie te veroorzaken.
Om de MIC in vaste media door antibiogram te bepalen, wordt aangenomen dat het microbiële middel van de schijf in de agar diffundeert en een concentratiegradiënt creëert; bijgevolg, hoe verder weg van de schijf, des te lager de concentratie van het geneesmiddel, die geleidelijk afneemt om de kritieke concentratie te bereiken (minimale benaderde remmende concentratie MIC). Voorbij dit punt is er sprake van samenvloeiende groei, terwijl in het gebied dat het dichtst bij de schijf ligt de groei afwezig is.
In het antibiogram op vloeibaar medium worden een reeks reageerbuizen met het kweekmedium bereid en geschaalde verdunningen (in de verhouding van 2) van het te testen antibioticum. In elk van deze buizen wordt een standaardhoeveelheid van de microben die worden onderzocht, geënt; volgt de incubatie en onderzoek van hetzelfde. Zoals verwacht, is in aanwezigheid van troebelheid bacteriegroei zichtbaar, terwijl een oplossing helder blijft, duidt op volledige remming van microbiële groei, met de nadruk op de optimale werkzaamheid van het geneesmiddel. In dit geval vertegenwoordigt de MIC (minimale remmende concentratie) de hoogste verdunning (dwz de laagste concentratie) antibioticum die in staat is om de groei van het micro-organisme volledig te remmen. De MBC (minimale bacteriedodende concentratie) wordt in plaats daarvan vastgesteld door de monsters genomen uit het vloeibare medium in een speciaal vast medium te laten groeien en de mogelijke bacteriegroei te evalueren. De MIC komt daarom overeen met de concentratie antibioticum die aanwezig is in de buis waarin het geneesmiddel meer verdund is en die bij cultureel onderzoek geen teken van bacteriële activiteit vertoont (zie figuur).
De resultaten van het antibiogram worden gepubliceerd in een specifiek rapport, waarin de gebruikte antibiotica en de bijbehorende MMC's worden vermeld; soms worden ook de associaties van antibiotica die kunnen worden gebruikt en de mate van resistentie van de micro-organismen vermeld.
De traditionele methoden voor het uitvoeren van het antibiogram, zeer nuttig voor educatieve doeleinden, evolueren voortdurend. Tegenwoordig zijn bijvoorbeeld geautomatiseerde commerciële systemen beschikbaar, terwijl bibula-papierkussentjes kunnen worden vervangen door stroken die incrementele doses antibioticum bevatten, op geschikte wijze aangeduid op de strip zelf (E-test voor antibiogram).
